濒危名贵药用霍山石斛类原球茎液体培养生产活性多糖的研究

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出版社:合肥工业大学出版社
出版日期:2011-10
ISBN:9787565004827
作者:查学强
页数:146页

作者简介

石斛作为传统名贵中草药,其资源再生、化学成分和药理活性逐渐引起人们的关注,其中多糖是石斛属植物中主要的药用活性成分之一。《濒危名贵药用霍山石斛类原球茎液体培养生产活性多糖的研究》由查学强著,以传统的名贵珍稀药用植物——霍山石斛为主要研究对象,在建立霍山石斛类原球茎多糖高效表达悬浮培养体系的基础上,利用生物大分子研究的最新技术和现代分离分析手段与药理实验方法,对霍山石斛类原球茎水溶性多糖进行了提取分离纯化,并对其主要活性多糖组分HPS-1823的组成和一级结构进行了研究。《濒危名贵药用霍山石斛类原球茎液体培养生产活性多糖的研究》适合药用石斛研究者阅读。

书籍目录

第1章 药用石斛资源及其可持续利用现状1.药用石斛应用及其资源现状2.药用石斛资源再生现状2.1 药用石斛的野生变家种2.2 药用石斛的组织培养3.药用石斛化学成分及药理作用4.课题构想第2章 霍山石斛类原球茎组织培养系的建立1.实验材料1.1 主要试剂1.2 主要仪器2.实验方法2.1 霍山石斛无菌苗的诱导2.2 霍山石斛类原球茎的诱导2.3 类原球茎增殖2.4 霍山石斛类原球茎长期继代培养的品质稳定性考察2.5 数据统计3.实验结果3.1 霍山石斛类原球茎的诱导3.2 霍山石斛类原球茎的增殖3.3 霍山石斛类原球茎的品质稳定性分析4.讨论第3章 霍山石斛多糖增强机体免疫功能的研究1.实验材料1.1 霍山石斛1.2 实验动物1.3 主要试剂1.4 主要仪器2.实验方法2.1 HPS的提取及含量测定2.2 HPS的DEAE-Cellulose分级分离2.3 RPMI-1640培养液配制方法2.4 HBSS液的配制2.5 脾细胞悬液的制备2.6 腹腔巨噬细胞悬液的制备2.7 HPS联合ConA诱导小鼠脾细胞产生IFN-γ2.8 HPS联合LPS诱导小鼠腹腔巨噬细胞产生TNF-α2.9 总RNA的提取2.10 RT-PCR2.11 统计分析3.实验结果3.1 霍山石斛HPS的提取和蛋白脱除3.2 野生霍山石斛HPs对小鼠脾细胞产生IFN-γ的影响3.3 野生霍山石斛HPs对小鼠脾细胞IFN-γmRNA表达的影响3.4 野生霍山石斛HPS对小鼠腹腔巨噬细胞产生TNF-α的影响3.5 野生霍山石斛HPS对小鼠腹腔巨噬细胞TNF-αmRNA表达的影响3.6 野生霍山石斛HPS不同组分的活性3.7 野生霍山石斛多糖与类原球茎多糖组分及生物学活性比较4.讨论第4章 霍山石斛类原球茎液体培养碳氮代谢分析1.实验材料1.1 霍山石斛类原球茎1.2 主要试剂1.3 主要仪器2.实验方法2.1 类原球茎悬浮培养与生长的测定2.2 多糖提取和含量测定2.3 可溶性糖含量的测定2.4 蔗糖磷酸合成酶(SPS,EC2.4.1.14)、蔗糖合成酶(SuSy,EC2.4.1.13)和蔗糖酶(IT,EC3.2.1.26)活性的测定2.5 可溶性离子NH、NO的含量测定2.6 硝酸还原酶(NR,EC1.6.6.1)、谷氨酸合酶(GOGAT,EC1.4.1.14)和谷氨酰胺合成酶(GS,EC6.3 .1 .2)活性的测定2.7 实验参数3.实验结果3.1 霍山石斛类原球茎的生长动态进程3.2 pH的动态变化3.3 胞内、胞外糖消耗的动态进程3.4 碳源代谢关键酶活性的动态变化3.5 胞内、胞外NH,和NOi消耗的动态进程3.6 氮源代谢相关酶活性的动态变化4.讨论第5章 霍山石斛类原球茎生长和多糖合成调控1.实验材料1.1 霍山石斛类原球茎1.2 主要试剂1.3 主要仪器2.实验方法2.1 类原球茎悬浮培养与生长的测定2.2 生长培养基优化方案设计2.3 多糖合成调节方案设计2.4 多糖提取与含量测定2.5 可溶性糖含量的测定2.6 霍山石斛多糖的DEAE-celltdose分级分离与含量测定2.7 霍山石斛类原球茎多糖的生物学活性评价2.8 实验参数3.实验结果3.1 类原球茎生长培养基的优化3.2 HPS合成的调控3.3 优化和调控条件下的HPS组分及生物活性评价4.讨论第6章 霍山石斛活性多糖的分离纯化及结构表征1.实验材料1.1 霍山石斛类原球茎1.2 主要试剂1.3 主要仪器2.实验方法2.1 HPS的提取和DEAE-Cellulose分级分离2.2 HPS-1的凝胶渗透色谱纯化2.3 多糖组分活性测定2.4 多糖的纯度及摩尔分子量测定2.5 HPS-1823的比旋光度的测定2.6 HPS-1823的扫描电镜观察2.7 刚果红实验2.8 紫外光谱分析2.9 HPS-1823单糖组成成分分析2.10 红外光谱分析2.11 高碘酸氧化反应2.12 Smith降解反应2.13 多糖甲基化分析2.14 多糖的部分酸水解分析2.15 多糖的核磁共振波谱分析3.实验结果3.1 霍山石斛多糖的凝胶柱色谱分离纯化3.2 类原球茎多糖HPS-1823纯度和分子量鉴定3.3 类原球茎多糖HPS-1823比旋光度的测定3.4 类原球茎多糖HPs-1B23的表观形态学观察3.5 刚果红实验分析3.6 类原球茎多糖HPS-1B23紫外光谱分析3.7 类原球茎多糖HPS-1B23单糖组成成分分析3.8 类原球茎多糖HPS-1823红外光谱分析3.9 类原球茎多糖HPS-1823相邻单糖连接方式的分析4.讨论第7章 结论

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