动物细胞培养

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出版社:科学出版社
出版日期:2008-2
ISBN:9787030207807
作者:费雷谢尼
页数:836页

作者简介

《动物细胞培养:基本技术指南(第5版)》除保留原有主要内容之外,为了适应细胞培养新手,尤其是生物制药工业中所涌现的技术人员的需要,专门新开辟了一章"培训纲要",其中包括基本技能训练、高阶练习以及相关实践等。另外,如同前版一样,本版也详尽介绍了如下内容:原代培养、细胞系、传代、分化、癌细胞和细胞转化、三维培养、大规模培养、分子细胞学技术、污染、特殊设备、细胞培养中可能遇到的难题及对策等。因此,本版最大特色可以概括为全面、新颖和实用。《动物细胞培养:基本技术指南(第5版)》可供有关大学师生尤其是研究生、科研人员、生物工程技术人员、临床医生以及所有从事生命科学研究的人员参考。弗雷谢尼所著的《动物细胞培养——基本技术指南》历来被看做是该领域的领衔之作。自2000年第四版问世以来,细胞培养及其相关学科的技术方法发展更加迅猛,诸如干细胞、组织工程、克隆以及体外毒性检测方面等均取得长足的甚至突破性的进展,为将这些内容和其他方面的新的资料融人该书,于是有了新的一版——五版的面世。

书籍目录

译者的话前言缩略语插图一览表彩图一览表第1章 绪论第2章 培训纲要第3章 培养细胞的生物学第4章 实验室设计与布局第5章 设备第6章 无菌技术第7章 安全性、生物伦理及验证第8章 培养器皿和附着物第9章 成分明确培养基及补充物第10章 无血清培养基第11章 准备与灭菌第12章 原代培养第13章 传代培养和细胞系第14章 克隆培养及筛选第15章 细胞分离第16章 细胞鉴定第17章 分化第18章 转化和永生化第19章 污染第20章 细胞冷冻保存第21章 定量第22章 细胞毒性第23章 特殊类型细胞的培养第24章 肿瘤细胞培养第25章 器官型培养第26章 规模培养第27章 特殊技术第28章 问题与对策第29章 结语附录Ⅰ 试剂及配制附录Ⅱ 设备及材料来源附录Ⅲ 供应商和其他资源附录Ⅳ 术语附录Ⅴ 普通教科书及相关期刊参考文献索引彩图

编辑推荐

  本书是有关动物细胞培养技术、设备、原理和实践最全面的资料源泉。  开辟了全新的一章——细胞培养培训纲要,增添了有关干细胞、生物伦理,合法性问题、克隆、细胞信号,体外毒性检测,以及组织工程等内容。彩图包括原代培养、细胞系,,传代、分化、癌细胞和转化。三维培养、污染、特殊设备,比前一版增加了一倍。困难及对策的资料是经验的结晶,与时俱进的全新参考文献,实验程序的描述翔实而简明,众多的示意图、照片、表格,无不一目了然,附有试剂、设备等相关信息及网址,利于开展工作。  本书作者R.I.弗雷谢尼博士为格拉斯哥大学英国Beatsor癌症研究实验室肿瘤学与临床药理学中心的荣誉资深研究员。自编著第一版至第五版以来,殚精竭虑、呕心沥血,终使本书成为细胞培养中的传世经典之作。

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发布书评

 
 


精彩书评 (总计2条)

  •     chapter 11.1 历史 组织培养是20世纪初才创建的一种研究动物细胞行为的方法。在使用分散性的细胞培养之前,组织培养是以未离散的组织小块进行操作的。Gey1952年建立了第一个连续的人细胞系,即hela细胞。具体事件见表1.1 细胞和组织培养发展史中的关键事件1.2 主要概念器官培养(organ culture) 是指未离散组织的三位培养,保持着体内组织部分或全部组织学特征原代外植块培养primary explant culturecell culture细胞培养,是指离散细胞的培养,这些细胞是经酶学的,机械的,或化学方法从来源组织,原代培养物primary culture,细胞系cell line 或细胞株cell strain中获得的。Histotypic culture 组织型培养意为细胞重新聚集/生长并重建一个具有组织样细胞密度的三位结构。器官型培养organotypic culture的操作程序一样,但是将不同的细胞谱系重组。传代passagemonolayeranchorage dependence1.3 细胞培养的运用1. 细胞内的活动,如DNA的复制和转录,蛋白质的合成,能量代谢和药物代谢 2 细胞 物质内流,如RNA,激素受体复合物的易位和由此引起的信号转导过程以及膜运输3 环境间的相互作用,如营养,感染,细胞毒性,癌症发生,药物作用已经配体-受体相互作用4 细胞-细胞相互作用,如形态发生,旁分泌控制,细胞增殖动力学,代谢协同作用,细胞黏附和运动,机制相互作用,医学修复术和侵袭的器官型模型5 遗传学,包括正常和病理条件下的基因组分析,遗传操纵,转化和永生化6 细胞产物和分泌,生物技术,生物反应器设计,常务收获以及下游的加工等。1.4 组织培养的优点有:环境控制/ 样品的均一性/经济,规模和机械化/体内环境的体外模拟1.5 组织培养的局限性:需要必要的专业技能/所付出的努力和物质只能生产出相当少的一些组织/表型不稳定性/稳定的标记是坚定细胞所必须的/连续性细胞系的不稳定性1.6 体外 vs. 体内体外培养的细胞丧失了三位稽核的空间环境,以及他们在二位基质上增殖。体外的培养环境缺乏集中在体内参与稳态调控的系统调控成分,尤其是神经系统,内分泌系统的稳态调节。体外培养过程中的能量代谢主要表现为糖酵解。Chapter 2 无菌技术和污染正确的无菌技术是在培养物外环境的微生物和在干净的未被污染的培养瓶或培养皿内生长的培养物之间建立一个屏障。污染的可能性是由无菌操作和环境污染情况共同决定的。tips: 1 保持工作面的洁净(包括充分擦洗工作面,整理好工作区的东西,移走不需要的物品(如果洁净台里的设备很拥挤,无菌空气就不能有效地层流),随时擦洗任何溢出物, 实验完毕后,移走所有物品,并彻底擦洗工作面,在视野范围内操作)2 不用抗生素培养,定期用肉眼和显微镜观察3 按常规检查细胞支原体4 引入的细胞系来源可信赖,对引入的细胞系进行检疫;做了支原体检查;有档案记录5 输出的细胞系进行了支原体检查;证明来源有效;提供数据单;三层包装。6 个人防护7 在组织培养中,分装常遇到的问题是速度和精确性之间的矛盾。防止交叉污染。8 移液时要倾斜培养瓶;用二氧化碳过滤供给管道供应气体;叠放,考虑通气;倾倒的主要危害是产生了连接试剂瓶内外的液体“桥”,这可能会污染物进入试剂瓶 。9 避免培养基进入盖子和底部间微小空间。若出现上述情况,用蘸70%乙醇的无菌纸小心地从盖子外边缘拭去培养基,并换上一个新的盖子。 10 洁净台分为两种,水平式洁净台和垂直式层流洁净台。水平式层流洁净台提供的气流最稳定,对培养物和试剂的无菌保护作用很强;垂直式层流洁净台则给操作者以更多保护。对在垂直式洁净台中操作来说,不要立即在开口器皿的上方操作;对在水平式洁净台中操作来说,则不要再开口器皿的后方操作。层流洁净台也必须定期维护保养。污染细菌、酵母、真菌 、霉菌 、支原体以及 原生 动物 等 都是 组织 培养的污染物。支原体 感染 除了 能 表现 出 培养的 细胞 长得 不好 之外 ,是 不能 用常规显微镜检查出来的。培养物必须用 特殊荧光染色、PCR、ELISA测定、免疫染色、放射自显影或 微生物学 方法来鉴定。去除污染的 首要原则是丢弃培养物及培养基和有关试剂。避免交叉污染的操作:1 从声誉较好的细胞库获得细胞系,他们对细胞系都有论证,或者自己应尽早进行必要的鉴定。2不要将一个以上的细胞系的培养瓶或装有培养它们 的培养基的瓶子同时打开3应在处理其他培养之后,再处理如hela那样迅速生长的细胞系4绝对不要对不同细胞系使用同一个吸量管5对不同细胞系,绝对不要使用同一瓶培养液、同一瓶胰蛋白酶6当吸管已放入含有细胞的培养瓶之后,不要将吸管放回培养基瓶或胰蛋白酶瓶中7首先加入培养液和任何其他试剂,最后再加入细胞8常规检查培养物的特性,觉察任何突然发生的形态学改变、生长率改变及其他表型的改变
  •     chapter 3 培养细胞的生物学 3.1 环境通过以下四条途径对培养细胞产生影响:1 细胞生长的附着物或支持物性质2 与其他细胞的接触程度 3培养基的理化性质和成分 4气相成分5培养温度3.2 3.2.1细胞的黏附是通过特意的细胞表面受体与细胞外基质分子结合实现的,在细胞铺展之前,细胞已分泌了细胞外基质蛋白和蛋白聚糖。三大类跨膜蛋白参与了细胞与细胞、细胞与底物的黏附。细胞间黏附分子-不依赖二价钙离子的钙调素CAMs 和依赖二价钙离子的钙黏着蛋白主要参与同源细胞间的相互作用。细胞与基质之间的相互作用主要由整合蛋白介导。第三类黏附分子式跨膜的蛋白聚糖。蛋白酶可消化细胞外基质,甚至通过降解跨膜蛋白的包歪曲是组织细胞和培养的单层贴壁细胞彼此分离。3.2.2 细胞间连接3.2.3 细胞外基质细胞外基质ECM分布在组织细胞的外部空间,其成分由细胞类型决定。胞外基质的复杂性是附着其上的细胞表型表达的重要影响因素,附着在胞外基质上的细胞类型的动态平衡控制的基质的组成,而基质成分反过来又影响细胞表型。3.2.4 细胞骨架3.2.5细胞迁移。 接触抑制3.3 细胞增殖高细胞密度能抑制正常细胞增殖,但不能抑制转化细胞增殖,细胞互相接触可导致增殖抑制,细胞拥挤和伸展受限导致的细胞形状改变使抑制作用进一步加强。3.4 细胞分化N正常细胞系;C连续细胞系;I永生细胞系;T转化细胞系细胞增殖能力的提高限制了细胞分化特性的表现。去分化是只细胞在体外失去他们的原有特性。但是有不好界定的情况:1 细胞系选择错误2同一谱系的未分化细胞快速生长后,最终形成增值能力低下的分化细胞 3 缺乏适宜的诱导物导致细胞分化特征适应性、可逆性的丧失。细胞去分化、细胞去适应性和细胞选择。3.5 细胞信号传递内分泌是指信号分子通过体内脉管系统从一种细胞转移到另一种组织细胞发挥作用;旁分泌是指不通过血液而直接作用于邻近细胞的方式。某些细胞分泌的可溶性信号物质作用于同类型细胞,称为同型旁分泌或同型分泌;同一细胞类型分泌的信号物质作用于不同的反应蛋白,称为异型旁分泌;由细胞自身合成并通过与自身受体结合作用于细胞自身的信号物质称为自分泌信号物质。在体外,具有基本培养基的常规条件下,只有自分泌和同型分泌两种方式。 3.6 原代 培养是一系列细胞选择过程的第一步,其最终结果是产生一个相对均一的细胞系。待续

精彩短评 (总计6条)

  •     终于读完了Freshney的《动物细胞培养》,有的章节读了两三遍,不愧为细胞培养领域的圣经。
  •     细胞学基本技术入门书籍
  •     很好!!!!很好!!!!!!
  •     外文翻译过来的,,就是废话一堆!!!
  •     为神马译本都这么傻逼呢!!!
  •     这么厚一本呀
 

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